Antibiotická odolnost mikroorganismů: metody pro stanovení

Antibiotika - jeden z největších úspěchů lékařské vědy, který každoročně šetří životy desítek a stovek tisíc lidí. Nicméně, jak moudrost říká, stará žena má také erudici. Co předtím zabíjelo patogenní mikroorganismy, dnes nefunguje tak, jak tomu bylo dříve. Takže jaký je důvod: zhoršily se antimikrobiální vlastnosti nebo z důvodu rezistence na antibiotika?

Stanovení odolnosti proti antibiotikům

Antimikrobiální látky (APM), které se nazývají antibiotika, byly původně vytvořeny pro boj s bakteriální infekcí. A vzhledem k tomu, že různé nemoci mohou způsobit ne jeden, ale několik druhů bakterií seskupených dohromady, byl původně proveden vývoj léků účinných proti určité skupině infekčních agens.

Ale bakterie, i když nejjednodušší, ale aktivně se rozvíjející organismy, nakonec získávají stále více nových vlastností. Instinkt sebepozorování a schopnost přizpůsobit se různým životním podmínkám činí patogenní mikroorganismy silnější. V reakci na ohrožení života začínají samy o sobě rozvíjet schopnost odolávat, zdůrazňovat tajemství, které oslabuje nebo úplně neutralizuje účinek účinné látky antimikrobiálních látek.

Ukazuje se, že jakmile účinné antibiotika prostě přestanou plnit svou funkci. V tomto případě mluví o vývoji antibiotické rezistence na léčivo. A zde není vůbec účinnost účinné látky AMP, ale mechanismy zlepšování patogenních mikroorganismů, díky nimž nejsou bakterie citlivé na antibiotika určená k boji proti nim.

Takže rezistence na antibiotika není nic jiného než snížení citlivosti bakterií na antimikrobiální léky, které byly vytvořeny k jejich zničení. Z tohoto důvodu se zdá, že léčba správně vybraných přípravků neposkytuje očekávané výsledky.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7], [8], [9], [10]

Problém antibiotické rezistence

Nedostatek antibiotické terapie, spojený s rezistencí na antibiotika, vede k tomu, že onemocnění pokračuje v pokročilém vývoji a přeměňuje se na těžší formu, jejíž léčba se stává ještě obtížnějším. Zvláště nebezpečné jsou případy, kdy bakteriální infekce postihuje životně důležité orgány: srdce, plíce, mozek, ledviny atd., Protože v tomto případě je zpoždění úmrtí podobné.

Druhým nebezpečím je, že některé nemoci s chronickou antibiotickou léčbou se mohou chronit. Osoba se stává nosičem zlepšených mikroorganismů odolných vůči antibiotikům určité skupiny. On je nyní zdrojem infekce, aby bojoval proti tomu, že staré metody jsou bezvýznamné.

To všechno tlačí farmaceutickou vědu k objevení nových účinnějších prostředků s jinými účinnými látkami. Tento proces se však opět rozvíjí s rozvojem rezistence vůči antibiotikům na nové léky z kategorie antimikrobiálních látek.

Pokud se někdo domnívá, že problém antibiotické rezistence vznikl docela nedávno, je velmi mylný. Tento problém je starý jako svět. No, možná ne tak moc, a přesto je jí už 70-75 let. Podle obecně uznávané teorie se objevilo společně s uvedením prvních antibiotik do lékařské praxe někde ve 40. Letech 20. Století.

I když existuje koncepce dřívějšího výskytu problému rezistence mikroorganismů. Před příchodem antibiotik nebyl tento problém konkrétně řešen. Je tak přirozené, že se bakterie, stejně jako jiné živé věci, snažily přizpůsobit se nepříznivým podmínkám prostředí, dělaly svou vlastní cestou.

Problém rezistence patogenních bakterií se sám odvolával, když se objevily první antibiotika. Nicméně otázka nebyla tak důležitá. V té době, aktivně řídil vývoj různých skupin antibiotik, které jsou v některých ohledech byla způsobena nepříznivou politickou situaci ve světě, války, kdy vojáci zemřel na následky zranění a sepse jen proto, že nemohla poskytnout účinnou pomoc kvůli nedostatku léků. Jen ty drogy dosud neexistovaly.

Největší počet vývojů se uskutečnil v 50-60 letech dvacátého století a během následujících dvou desetiletí došlo k jejich zlepšení. Pokrok v této oblasti nebyl ukončen, ale od 80. Let se vývoj v oblasti antibakteriálních látek výrazně snížil. Vině, zda k velkým nákladům na podnikání (vývoj a výrobu nového produktu v naší době je již na hranici v USA 800 milionů $), nebo jednoduché nedostatek nových nápadů pro „militantní“ účinné látky inovativních léčiv, ale v souvislosti s problémem rezistence vůči antibiotikům za na novou děsivou úroveň.

Při vývoji slibných AMP a vytvoření nových skupin takových léků vědci doufali, že porazí několik typů bakteriálních infekcí. Ale všechno se ukázalo být ne tak jednoduché, díky "odolnosti vůči antibiotikům, která se v jednotlivých kmenech bakterií vyvíjí poměrně rychle. Nadšení postupně vysychá, problém však zůstává nevyřešen dlouho.

Zůstává nejasné, jak mohou mikroorganismy vyvinout odpor vůči lékům, které by je teoreticky měly zabít? Zde je třeba si uvědomit, že "zabíjení" bakterií dochází pouze tehdy, když je droga používána pro svůj zamýšlený účel. A co vlastně máme?

Příčiny rezistence vůči antibiotikům

Zde se dostáváme k hlavní otázce, kdo je na vině, že bakterie, když jsou vystaveny antibakteriálních látek neumírají, a naprosto zvrhlé tím, že získá nové vlastnosti, která není v rukou lidstva? Co vyvolává takové změny, ke kterým dochází u mikroorganismů, které jsou příčinou mnoha nemocí, s nimiž lidstvo bojuje více než deset let?

Je zřejmé, že skutečnou příčinou vzniku rezistence vůči antibiotikům je schopnost živých organismů přežít v různých podmínkách, přizpůsobovat se jim různými způsoby. Ale schopnost vyhnout se smrtelnému projevu před antibiotikem, který by teoreticky měl přinést smrt pro ně, bakterie ne. Jak se tedy ukáže, že nejenže přežijí, ale také se zlepší spolu se zlepšením farmaceutických technologií?

Je třeba si uvědomit, že pokud existuje problém (v našem případě vývoj rezistence vůči antibiotikům u patogenních mikroorganismů), pak existují provokativní faktory, které pro ni vytvářejí podmínky. Právě v této věci se nyní snažíme porozumět.

[11], [12], [13], [14], [15], [16], [17], [18], [19]

Faktory rozvoje antibiotické rezistence

Když člověk přijde k lékaři se stížnostmi na své zdraví, očekává kvalifikovanou pomoc odborníka. Pokud jde o infekci dýchacího ústrojí nebo jiných bakteriálních infekcí, je lékařem úkolem předepisovat účinné antibiotikum, které neumožní vývoj onemocnění, a určit dávku nezbytnou pro tento účel.

Volba léků u lékaře je dost velká, ale jak přesně určit drogu, která opravdu pomáhá vyrovnat se s infekcí? Na jedné straně, abychom ospravedlnili jmenování antimikrobiálního léčiva, je třeba nejdříve určit typ patogenu podle etiotropního konceptu výběru léčiva, který je považován za nejpravděpodobnější. Na druhou stranu to může trvat až 3 nebo více dní, zatímco nejdůležitější podmínkou pro úspěšné vyléčení se považuje včasná léčba v počátečních stádiích onemocnění.

Lékař po diagnóze nemá nic co dělat, aby náhodně jednal v prvních dnech, aby nějakým způsobem zpomalil onemocnění a zabránil jeho šíření do jiných orgánů (empirický přístup). Při jmenování ambulantní léčby praktik postupuje z předpokladu, že určité bakterie mohou být příčinou určitého onemocnění. To je důvod pro počáteční volbu léku. Účel se může lišit v závislosti na výsledcích testu patogenu.

A je dobré, pokud je jmenování lékaře potvrzeno výsledky testů. V opačném případě se ztratí nejen čas. Faktem je, že pro úspěšnou léčbu existuje ještě jedna nezbytná podmínka - úplná deaktivace (v lékařské terminologii existuje pojem "vykradnutí") patogenních mikroorganismů. Pokud se tak nestane, přežívající mikrobi se jednoduše "zhorší" a vyvinou takovou imunitu vůči účinné látce antimikrobiální drogy, která způsobila jejich "nemoc". To je stejně tak přirozené jako produkce protilátek v lidském těle.

Ukazuje se, že pokud je antibiotikum zachyceno nesprávně nebo neúčinné, režim dávkování a podávání se ukáže, patogenní mikroorganismy nemohou vymizet, ale změnit nebo dosáhnout dříve neobvyklých možností. Chov, tyto bakterie tvoří celou populaci kmenů rezistentních vůči antibiotikům určité skupiny, tj. Antibiotické rezistentní bakterie.

Dalším faktorem, který nepříznivě ovlivňuje náchylnost patogenních mikroorganismů k antibakteriálním lékům, je použití AMP v chovu zvířat a ve veterinární medicíně. Použití antibiotik v těchto oblastech není vždy opodstatněné. Kromě toho se definice příčinného činidla ve většině případů neuskutečňuje nebo se provádí s prodlevou, neboť antibiotika jsou léčena převážně zvířaty, která jsou v poměrně vážném stavu, když vše rozhodne o čase a čekat, až výsledky analýzy nebudou možné. A ve vesnici veterinář nemá vždy ani tuto příležitost, a tak jedná "zaslepeně".

Ale to by nebylo nic, jenom je další velký problém - lidská mentalita, když každý je doktor pro sebe. Kromě toho vývoj informačních technologií a možnost nákupu většiny antibiotik bez lékařského předpisu jen zhoršují tento problém. A pokud vezmeme v úvahu, že máme více než nekvalifikovaných samoaktivních lékařů než ti, kteří striktně dodržují doporučení a doporučení lékaře, problém získá globální dimenzi.

V naší zemi se situace zhoršuje skutečností, že většina lidí zůstává finančně bankrotovatelná. Nemají možnost nakupovat účinné, ale drahé léky nové generace. V tomto případě nahradí jmenování lékaře levnějšími analogy nebo léky, které doporučil nejlepší přítel nebo všudypřítomný přítel.

"Pomohlo mi to a pomůže vám!" - můžete s tímhle argumentovat, pokud se slova ozývají z rtů souseda, který zvládl bohatou životní zkušenost, kdo prošel válkou? A jen málo lidí si myslí, že díky tak dobře čteným a důvěryhodným patogenním mikroorganismům se dlouho přizpůsobili, aby přežili pod působením léků doporučovaných v dřívějších dobách. A co pomohlo dědečkovi před padesáti lety, může být v naší době neúčinné.

A co můžeme říci o reklamě a nevysvětlitelné touze některých lidí zkoušet inovace na sobě, jakmile se objeví symptom-vhodné nemoci. A proč všichni tito doktoři, jestli existují takové nádherné drogy, o kterých se dozvídáme z novin, televizních obrazovek a internetových stránek. Jen text o samoléčbě je už tak nudný, že ho teď jen málo lidí věnuje pozornost. A velmi marně!

[20], [21], [22], [23], [24], [25], [26], [27], [28], [29], [30]

Mechanismy rezistence vůči antibiotikům

Nedávno se antibiotická rezistence stala problémem číslo jedna ve farmakologickém průmyslu, který vyvíjí antimikrobiální látky. Věc spočívá v tom, že je téměř všech známých odrůd bakterií, takže antibiotická terapie je stále méně účinná. Tyto společné patogeny, jako jsou Staphylococcus, Escherichia a Pseudomonas aeruginosa, Próteus mají odolné kmeny, které jsou distribuovány přes jejich předchůdců vystavených na antibiotika.

Odolnost vůči různým skupinám antibiotik a dokonce i jednotlivým lékům se vyvíjí různými způsoby. Starý dobrý penicilin a tetracykliny, jakož i nový vývoj v podobě cefalosporinů a aminoglykosidů jsou charakterizovány pomalého rozvoje rezistence k antibiotikům, a to souběžně s těmito poklesy a jejich terapeutický účinek. Co se nedá říct o takových lécích, jejichž účinnou látkou jsou streptomycin, erythromycin, rifampicin a lincomycin. Odolnost proti těmto lékům se vyvíjí rychlým tempem, v souvislosti s nimiž musí být jmenování změněno iv průběhu léčby, aniž by čekalo na jeho ukončení. Totéž platí pro přípravky oleandomycinu a fusidinu.

To vše dává důvod předpokládat, že mechanismy rozvoje rezistence k antibiotikům k různým lékům jsou výrazně odlišné. Pokusme se pochopit, které vlastnosti bakterií (přirozených nebo získaných) neumožňují antibiotikům produkovat jejich ozařování, jak bylo původně koncipováno.

Za prvé, zjistíme, že rezistence bakterie může být přirozená (na začátku jejích ochranných funkcí) a získala, což jsme diskutovali výše. Zatím jsme mluvili hlavně o skutečné rezistenci na antibiotika spojenou s vlastnostmi mikroorganismu a nikoliv s nesprávnou volbou nebo předepisováním léku (v tomto případě se jedná o falešnou odolnost proti antibiotikům).

Každá živá bytost, včetně nejjednodušší, má svou vlastní jedinečnou strukturu a některé vlastnosti, které jí umožňují přežít. To vše je geneticky stanoveno a přenášeno z generace na generaci. Přírodní rezistence na specifické účinné látky antibiotik je také stanovena geneticky. A u různých typů bakterií je rezistence zaměřena na určitý typ léčiv, což je důvod, proč je spojeno rozvíjení různých skupin antibiotik ovlivňujících určitý druh bakterií.

Faktory, které způsobují přirozený odpor, mohou být různé. Například struktura proteinové membrány mikroorganismu může být taková, že se antibiotikum nemůže vyrovnat s tím. Ale antibiotika mohou být ovlivněna pouze proteinovou molekulou, ničí ji a způsobí smrt mikroorganismu. Vývoj účinných antibiotik předpokládá zohlednění struktury bílkovin bakterií, proti kterým je léčba účinná.

Například antibiotická rezistence stafylokoků k aminoglykosidům je způsobena skutečností, že tyto nemohou proniknout do mikrobiální membrány.

Celý povrch mikrobu je pokryt receptorem, některé typy jsou spojeny s AMP. Malý počet vhodných receptorů nebo jejich úplná nepřítomnost vedou k tomu, že neexistuje vazba a proto neexistuje antibakteriální účinek.

Mezi dalšími receptory existují také ty, které pro antibiotikum slouží jako druh majáku signalizující umístění bakterií. Absence takových receptorů umožňuje mikroorganismu skrýt se před nebezpečím ve formě AMP, což je jakýsi druh převlečení.

Některé mikroorganismy mají přirozenou schopnost aktivně odebírat AMP z buňky. Tato schopnost se nazývá effluksom a charakterizuje rezistenci Pseudomonas aeruginosa proti karbapenemům.

Biochemický mechanismus rezistence vůči antibiotikům

Vedle přirozených mechanismů vývoje rezistence k antibiotikům uvedených výše existuje ještě jedno, které se netýká struktury bakteriální buňky, ale její funkčnosti.

Skutečnost, že v těle bakterií mohou být produkovány enzymy, které mohou mít negativní účinek na molekuly účinné látky AMP a snížit její účinnost. Bakterie při interakci s takovým antibiotikem také trpí, jejich účinek je výrazně oslabený, což vytváří vzhled léčivé infekce. Nicméně pacient zůstává nositelem bakteriální infekce po nějakou dobu po tzv. "Zotavení".

V tomto případě se jedná o modifikaci antibiotika, v důsledku čehož se stává neaktivní vzhledem k tomuto typu bakterií. Enzymy produkované různými typy bakterií se mohou lišit. Staphylococcus se vyznačuje syntézou beta-laktamázy, která způsobuje prasknutí laktamového kruhu antibiotik z řady penicilinů. Vývoj acetyltransferázy může vysvětlit rezistenci na gram-negativní bakterie chloramfenikolu atd.

[31], [32], [33], [34]

Získaná odolnost vůči antibiotikům

Bakterie, stejně jako jiné organismy, nejsou vývojem cizí. V reakci na "vojenské" akce proti nim mohou mikroorganismy změnit svou strukturu nebo začít syntetizovat tolik enzýmové látky, které mohou nejen snížit účinnost léku, ale i úplně jej zničit. Aktivní produkce alanin transferázy například činí "Cycloserin" neúčinnou proti bakteriím, které ji produkují ve velkém množství.

Antibiotická rezistence se může také rozvinout díky modifikaci buněčné struktury proteinu, což je také jeho receptor, ke kterému by se měl AMP vázat. Tedy. Tento druh bílkovin může chybějící v bakteriálním chromozómu nebo změnit jeho vlastnosti, což vede k tomu, že spojení mezi bakterií a antibiotikem je nemožné. Například ztráta nebo modifikace proteinu vázajícího penicilin způsobuje necitlivost na peniciliny a cefalosporiny.

S vývojem a aktivaci ochranné funkce v baktériích, předtím vystaven korozivním účinkům určitých druhů antibiotik, změní propustnost buněčných membrán. Toho lze dosáhnout snížením kanálů, kterými mohou účinné látky AMP pronikat do buňky. Tyto vlastnosti jsou způsobeny necitlivostí streptokoků na beta-laktamová antibiotika.

Antibiotika mohou ovlivnit buněčný metabolismus bakterií. V reakci na ně se některé mikroorganismy naučily dělat bez chemických reakcí, které jsou ovlivněny antibiotiky, což je také samostatný mechanismus pro vývoj rezistence vůči antibiotikům, který vyžaduje neustálé monitorování.

Někdy bakterie jdou na určitý trik. Spojením se s hustou látkou jsou spojeny v komunitách nazývaných biofilmy. V komunitě jsou méně citliví na antibiotika a mohou bezpečně tolerovat dávky zabíjení jedné bakterie, která žije mimo "kolektivní".

Další možností je kombinovat mikroorganismy do skupin na povrchu polotuhého média. Dokonce i po rozdělení buněk zůstává část bakteriální "rodiny" ve skupině, která nemůže být ovlivněna antibiotiky.

[35], [36], [37], [38], [39], [40], [41], [42], [43]

Geny antibiotické rezistence

Existují pojmy genetické a non-genetické rezistence léků. S druhým se zabýváme, když se zabýváme bakteriemi s neaktivním metabolizmem, které nejsou náchylné k násobení za normálních podmínek. Takové bakterie mohou vyvinout antibiotickou rezistenci vůči určitým druhům léčiv, nicméně tato schopnost se nesmí přenášet na jejich potomstvo, protože není geneticky začleněna.

To je charakteristické pro patogenní mikroorganismy, které způsobují tuberkulózu. Člověk se může dostat na infekci a nepochybovat o nemoci po mnoho let, dokud jeho imunita z nějakého důvodu nebude selhat. Toto je spoušť pro násobení mykobakterií a progresi onemocnění. Ale všechny stejné léky jsou používány k léčbě tuberkulózy, bakteriální potomstvo je stále citlivé na ně.

Totéž platí se ztrátou bílkovin v buněčné stěně mikroorganismů. Pamatujte, znovu o bakteriích, které jsou citlivé na penicilin. Peniciliny inhibují syntézu bílkoviny, která slouží k vytvoření buněčné membrány. Pod vlivem AMP mohou mikroorganismy řady penicilin ztratit buněčnou stěnu, jejíž stavební materiál je protein vázající penicilin. Takové bakterie se stávají odolnými vůči penicilinům a cefalosporinům, s nimiž se nyní nemají nic společného. Tento jev je dočasný, nesouvisí s mutací genů a přenosem mutovaného genu dědičností. Při vzhledu buněčné stěny, která je charakteristická pro předchozí populace, rezistentní antibiotika v takových bakteriích zmizí.

Genetická antibiotická rezistence se vyskytuje, když se změny v buňkách a metabolismus v nich vyskytují na úrovni genu. Mutace genů mohou způsobit změny ve struktuře buněčné membrány, vyvolat produkci enzymů, které chrání bakterie před antibiotiky a také měnit počet a vlastnosti receptorů bakteriální buňky.

Existují dva způsoby vývoje událostí: chromozomální a extrachromozomální. Pokud dojde k genové mutaci na té části chromozomu, která je zodpovědná za citlivost na antibiotika, mluví o odolnosti proti chromozomálním antibiotikům. Samotná taková mutace se vyskytuje extrémně vzácně, obvykle způsobuje účinky léků, ale znovu, ne vždy. Je velmi obtížné řídit tento proces.

Chromozomální mutace mohou být přenášeny z generace na generaci, postupně vytvářející určité kmeny (odrůdy) bakterií rezistentních vůči jednomu nebo jinému antibiotiku.

Chovatelé extrachromozomální rezistence na antibiotika jsou genetické prvky, které existují mimo chromozomy a jsou nazývány plazmidy. Právě tyto prvky obsahují geny odpovědné za produkci enzymů a permeabilitu bakteriální stěny.

Antibiotická rezistence je nejčastěji výsledkem horizontálního přenosu genů, kdy některé bakterie přenášejí některé geny na jiné, které nejsou jejich potomky. V genomu patogenu (velikost 1 v 108 pro jeden proces kopírování DNA mateřské buňky, který je pozorován při replikaci chromozomů) se však někdy vyskytují nespojené bodové mutace.

Takže na podzim roku 2015 vědci z Číny popsali gen MCR-1, který se nachází ve vepřové masce a ve střevech prasat. Vlastností tohoto genu je možnost jeho přenosu do jiných organismů. Po nějakém čase byl nalezen stejný gen nejen v Číně, ale iv jiných zemích (USA, Anglii, Malajsii, evropské země).

Geny odolnosti proti antibiotikům jsou schopné stimulovat tvorbu enzymů, které nebyly dříve produkovány v těle bakterií. Například enzym NDM-1 (kovová beta-laktamasa 1), nalezený v roce 2008 bakterií Klebsiella pneumoniae. Zpočátku to bylo zjištěno u bakterií z Indie. V následujících letech byl však v jiných zemích (Velká Británie, Pákistán, USA, Japonsko, Kanada) detekován enzym poskytující antibiotickou rezistenci proti většině AMP.

Patogenní mikroorganismy mohou být rezistentní vůči určitým lékům nebo skupinám antibiotik, stejně jako různým skupinám léčiv. Existuje taková věc, jako je rezistence vůči antibiotikům, kdy mikroorganismy jsou necitlivé na léky s podobnou chemickou strukturou nebo mechanismem působení na bakterie.

Antibiotická rezistence stafylokoků

Stafylokoková infekce je považována za jednu z nejčastějších infekcí získaných v komunitě. Nicméně i v nemocnici na povrchu různých objektů je možné detekovat asi 45 různých kmenů stafylokoků. To naznačuje, že boj proti této infekci je téměř první prioritou zdravotnických pracovníků.

Obtížnost tohoto úkolu je, že většina kmenů většiny patogenních stafylokoků Staphylococcus epidermidis a Staphylococcus aureus jsou odolné vůči mnoha typů antibiotik. A počet těchto kmenů roste každým rokem.

Schopnost stafylokoků k více genetickým mutacím, v závislosti na podmínkách stanovišť, je činí prakticky nezranitelnými. Mutace jsou přenášeny na potomky a v krátké době jsou přítomny celé generace infekčních agens odolných vůči antimikrobiálním přípravkům z rodu Staphylococci.

Největším problémem - to je stafylokoky rezistentní kmeny, které jsou rezistentní nejen k beta-laktamy (β-laktamová antibiotika: některé podskupiny penicilinů, cefalosporinů, karbapenemů a monobaktamů), ale i další druhy ILA: tetracykliny, makrolidy, linkosamidy, aminoglykosidy, fluorochinolony, chloramfenikol.

Po dlouhou dobu by infekce mohla být zničena pouze pomocí glykopeptidů. V současné době je problém antibiotické rezistence těchto kmenů stafylokoků řešen pomocí nového typu AMP - oxazolidinonů, jejichž jasným představitelem je linezolid.

[44], [45], [46], [47], [48], [49], [50], [51], [52], [53], [54], [55], [56]

Metody stanovení rezistence vůči antibiotikům

Při vytváření nových antibakteriálních léků je velmi důležité jasně definovat jeho vlastnosti: jak fungují a jaké bakterie jsou účinné. To lze určit pouze laboratorním výzkumem.

Analýzu odolnosti vůči antibiotikům lze provést různými metodami, z nichž nejoblíbenější jsou:

• Disc metodou nebo difúzí AMP v agaru podle Kirby-Bayer
• Metoda sériového ředění
• Genetická identifikace mutací, které způsobují rezistenci vůči lékům.

Dosavadní první metoda je považována za nejčastější způsob, kvůli nízké a jednoduché realizaci. Podle tohoto způsobu je to, že jednotky v důsledku účelových výzkumných kmenů bakterií jsou umístěny v živném médiu o dostatečné hustotě a pokryta papírem namočeným v roztoku AMP pohonů. Koncentrace antibiotika na discích je odlišná, takže když se léčivo difunduje do bakteriálního média, lze pozorovat koncentrační gradient. Vzhledem k velikosti zóny růstu mikroorganismů lze hodnotit účinnost přípravku a vypočítat účinnou dávku.

Varianta metody disku je E-test. V tomto případě se namísto disků používají polymerní desky, na které se aplikuje určitá koncentrace antibiotika.

Nevýhodou těchto metod je považován za nepřesné výpočty spojené s v závislosti na různých podmínkách (hustoty média, teplota, pH, vápník a hořčík, atd) koncentračního gradientu.

Způsob sériového zředění je založen na vytvoření několika variant kapalného nebo hustého média obsahujícího různé koncentrace testovaného přípravku. Každá z variant je osídlena určitým množstvím studovaného bakteriálního materiálu. Na konci inkubační doby se odhaduje růst bakterií nebo její nepřítomnost. Tato metoda vám umožňuje určit minimální účinnou dávku léku.

Metoda může být zjednodušena tím, že se vezme jako vzorek pouze 2 média, jejichž koncentrace bude co nejblíže minimu potřebnému k inaktivaci bakterií.

Metoda sériového ředění je správně považována za zlatý standard pro stanovení rezistence vůči antibiotikům. Vzhledem k vysokým nákladům a namáhavosti však není vždy použitelná v domácí farmakologii.

Způsoby identifikace mutací poskytnout informace o přítomnosti určitého kmene bakterií mutovaných genů, které přispívají k rozvoji odolnosti vůči antibiotikům na konkrétní léčiva, a proto nastat situace, organizovat na základě podobnosti fenotypové projevy.

Tato metoda se vyznačuje vysokou cenou testovacích systémů pro její realizaci, avšak její hodnota pro předpovědi genetických mutací u bakterií je nepopiratelná.

Bez ohledu na to, jak jsou účinné výše uvedené metody testování odolnosti proti antibiotikům, nemohou zcela odrážet obraz, který se rozvíjí v živém těle. A vezmeme-li v úvahu dobu, že tělo každého člověka se liší, existují různé procesy mohou projít distribuci a metabolismus léků, experimentální obraz je velmi daleko od reality.

Způsoby překonání rezistence vůči antibiotikům

Nezáleží na tom, jak je to dobré nebo že je droga, ale s postojem k léčbě, který máme, nelze vyloučit skutečnost, že v určitém okamžiku se může změnit citlivost patogenních mikroorganismů. Vytvoření nových léčiv se stejnými účinnými látkami také nevyřeší problém antibiotické rezistence. A na nové generace léků se postupně oslabuje citlivost mikroorganismů s častými neodůvodněnými nebo nesprávnými jmenování.

Průlom v tomto ohledu se považuje za vynález kombinovaných přípravků, které se nazývají chráněné. Jejich použití je opodstatněné u bakterií, které produkují destruktivní enzymy pro běžné antibiotika. Ochrana populární antibiotika provedené zařazení nového léku speciálních prostředků (například, inhibitory enzymů, nebezpečných pro určitý typ ILA) jsou oříznuté produkci těchto enzymů zabraňuje bakterie a odstranění léčiva z buňky pomocí membránového čerpadla.

Jako inhibitory beta-laktamáz je obvyklé používat kyselinu klavulanovou nebo sulbaktam. Přidávají se v beta-laktamových antibiotikách, což zvyšuje jejich účinnost.

V současné době je vývoj léků, které mohou ovlivnit nejen jednotlivé bakterie, ale také ty, které se spojily do skupin. Boj proti bakteriím v biofilmu lze provádět pouze po jeho destrukci a uvolňování organismů dříve spojených chemickými signály. Co se týče možnosti destrukce biofilmu, vědci uvažují o takové formě léků jako bakteriofágy.

Boj proti jiným bakteriálním "seskupením" se provádí jejich přenesením do kapalného média, kde mikroorganismy začínají existovat odděleně a nyní je lze bojovat s konvenčními léky.

Tváří v tvář fenoménu rezistence v procesu léčby léků, lékaři řeší problém předepisování různých léků účinných proti izolovaným bakteriím, ale s různými mechanismy působení na patogenní mikroflóru. Například současně užívají léky s baktericidním a bakteriostatickým účinkem nebo nahradí jedno lék s jiným z jiné skupiny.

Prevence rezistence vůči antibiotikům

Hlavním úkolem antibiotické terapie je úplné zničení populace patogenních bakterií v těle. Tento úkol lze řešit pouze jmenováním účinných antimikrobiálních látek.

Účinnost se stanoví podle jejího spektrem účinku (ať už z této skupiny označené patogenu) schopnosti překonat antibiotické mechanismy rezistence, optimálně vybrané dávkovacího režimu, ve kterém je zničení patogenní mikroflóry. Kromě toho, při předepisování léku by měla být zvážena pravděpodobnost vzniku vedlejších účinků a dostupnost léčby u každého jednotlivého pacienta.

Při empirickém přístupu k léčbě bakteriálních infekcí není možné vzít v úvahu všechny tyto body. Vyžaduje vysokou profesionalitu lékaře a neustálé sledování informací o infekcích a účinných lécích proti nim, takže jmenování nebylo neoprávněné a nevedlo k rozvoji rezistence vůči antibiotikům.

Vytvoření špičkových zdravotnických středisek umožňuje léčit etiotropní léčbu, pokud je patogen poprvé detekován v kratší době, a poté je podáván účinný lék.

Prevence rezistence vůči antibiotikům může také být považována za kontrolu předepisování. Například u ARVI není jmenování antibiotik opodstatněné, ale přispívá k rozvoji odolnosti mikroorganismů vůči antibiotikům, které jsou prozatím ve stavu "spánku". Skutečnost, že antibiotika mohou vyvolat oslabení imunity, což zase způsobí reprodukci bakteriální infekce, která je pohřbena uvnitř těla nebo se do ní dostala zvenčí.

Je velmi důležité, aby předepsané léky splnily cíl, který je třeba dosáhnout. Dokonce i lék předepsaný pro profylaktické účely by měl mít všechny vlastnosti nezbytné k ničení patogenní mikroflóry. Volba náhodného léku nejenže neposkytuje očekávaný účinek, ale také zhoršuje situaci tím, že vyvine rezistenci k přípravě určitého druhu bakterií.

Zvláštní pozornost by měla být věnována dávkování. Malé dávky, které jsou neúčinné při boji s infekcí, opět vedou k vzniku antibiotické rezistence u patogenů. Není však třeba ji přehánět, protože antibiotickou terapií je velká pravděpodobnost vzniku toxických účinků a anafylaktických reakcí nebezpečných pro život pacienta. Zvláště pokud je léčba prováděna na ambulantním základě bez kontroly ze strany zdravotnického personálu.

Prostřednictvím médií je nezbytné předávat lidem nebezpečí samoléčby antibiotiky, stejně jako nedokončené léčby, když bakterie nezemřou, ale stávají se méně aktivními s vyvinutým mechanismem antibiotické rezistence. Stejný efekt poskytují také levné, nelicencované drogy, které nelegální farmaceutické společnosti zaujímají jako rozpočtové protějšky již existujících léků.

Velmi účinným opatřením k prevenci rezistence vůči antibiotikům je neustálé sledování stávajících infekčních agens a vývoj rezistence k antibiotikům v nich nejen na úrovni regionu nebo regionu, ale také v celostátním měřítku (a dokonce i v celém světě). Bohužel, to má jen sen.

Na Ukrajině systém kontroly infekce jako takový neexistuje. Byla přijata pouze určitá ustanovení, z nichž jedna (ještě v roce 2007!), Týkající se porodnických nemocnic, zahrnuje zavedení různých metod monitorování nozokomiálních infekcí. Ale všechno opět závisí na financích, a taková studia většinou nejsou vedena, nemluvě o doktorech z jiných oborů medicíny.

V Ruské federaci na problém rezistence vůči antibiotikům léčeni více odpovědnosti a důkazem toho je projekt „Mapa antimikrobiální rezistence v Rusku.“ Výzkum v této oblasti, sběr informací a jejich systemizace antibiotik obsahu mapy podílí těchto velkých organizací, jako je Výzkumný ústav Antimicrobial Chemotherapy, Meziregionální asociace mikrobiologie a antimikrobiální chemoterapii, jakož i vědecké a metodické antibiotikum monitorovací centrum odporu zřízeny na podnět Spolkové agentury pro zdravotnictví a sociální rozvoj.

Informace poskytované v rámci projektu jsou neustále aktualizovány a jsou k dispozici všem uživatelům, kteří potřebují informace o odolnosti vůči antibiotikům a účinné léčbě infekčních onemocnění.

Pochopení toho, jak důležitá je otázka snížení citlivosti patogenních mikroorganismů a nalezení dnešního řešení tohoto problému, postupuje postupně. Ale je to již první krok v cestě účinného boje proti problému nazývanému "odolnost vůči antibiotikům". A tento krok je nesmírně důležitý.